原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球最常见的恶性肿瘤之一，有着极高的发病率和死亡率[1]。我国是肝癌高发国家。Chen 等[2]发表的数据表明，我国肝癌发病率位居所有恶性肿瘤的第四，死亡率居第三，严重威胁着人们的健康。由于起病隐匿，肝癌在早期极难被发现。目前，血清甲胎蛋白（AFP）水平和影像学检查是诊断肝癌最为常用的方法[3]，但存在局限性（如AFP 诊断率约为70%）。近年来，液体活检[4]技术的发展使肿瘤的早期诊断成为可能，外泌体作为肿瘤微环境的组成成分，是液体活检的理想材料。肿瘤微环境（tumor microenvironment，TME）是肿瘤细胞存在的环境。除肿瘤细胞外，TME 还包括周围血管、基质细胞、成纤维细胞、免疫细胞、脂肪细胞、细胞外基质及信号分子等[10]，这些因素间相互作用，形成了复杂且适合肿瘤生长的微环境。外泌体在TME 细胞间通讯中发挥着重要作用。本文旨在对目前外泌体在肝癌微环境通讯中的作用进行简要综述，为后续基础研究与临床应用提供理论依据。

1 外泌体介导肝癌细胞间通讯

外泌体最初发现于绵羊的网织红细胞，是起源于胞内多泡体的直径30～150 nm 的杯状或饼状囊泡结构。几乎所有的细胞都能分泌外泌体，并在所有的体液（如血液、唾液等）中都能检测到外泌体。最初，外泌体被认为只是细胞向外运送代谢废物的载体，但后续研究发现其作为细胞间通讯的介质，在众多生理与病理活动中发挥重要作用。作为肿瘤微环境的组成部分，外泌体与癌症密切相关。众多研究表明，外泌体参与肝癌、乳腺癌、前列腺癌和肺癌等多种癌症的发生发展[6]，并发现其中的生物分子还可以反映肿瘤的部分特征，是实现肿瘤早期诊断的理想材料[7-8]。Xu 等发现肝癌患者血清外泌体中 和 lncRNA-LINC00635 的 高 表达均与淋巴结转移和总生存期相关，并可作为乙肝后肝癌诊断的新型标志物[29]。Wang 等则表明miR-122、miR-148a 和 miR-1246 的高表达在区分早期肝癌和肝硬化的能力上高于传统的AFP[30]。外泌体可以被肿瘤细胞内化，释放所携带的生物活性物质，改变受体细胞的生命活动。Chen 等的研究表明[11]，高转移性肝癌细胞系MHCC97H 分泌的外泌体可以通过激活MAPK/ERK 信号通路，来诱导低转移性肝癌细胞系（HLE）的上皮间质转化，提高其转移能力，这与在黑色素瘤中的研究结论相似[12]。同时，Chen 等还敲低了MHCC97H中的Rab27a（一种外泌体分泌相关蛋白），抑制了其外泌体的分泌，发现Rab27a-KD 细胞的转移、趋化和侵袭能力均显著增强[11]。这一结果也验证了外泌体是通过其中的生物分子来发挥作用的。此外，肝癌外泌体中的非编码RNA，如miR-93[13]和lncRNA FAL1[14]等，可通过调控靶细胞中的目标蛋白，激活或抑制相应的信号通路，从而增强肿瘤的增殖和侵袭能力。本课题组前期研究也发现miR-21 和miR-144 的联合诊断可以有效区分肝癌和肝硬化，并发现了这2 种miRNA 在患者血清外泌体中的富集现象，证明了外泌体用于液体活检的可行性[31]。而且本实验室最近首次发现新型雌激素受体ER-α36 在转录和翻译水平上均在肝癌外泌体上表达，其中ER-α36 mRNA 的表达特征表现为慢性乙型肝炎患者＞肝癌患者＞正常人（结果未发表），提示我们肝癌外泌体ER-α36 可作为肝癌诊断的潜在标志物。You 等[38]指出，在肝癌细胞中存在ER-α36 和表皮生长因子受体（EGFR）的正向调控环，ER-α36 可通过EGFR/Src/ERK、MAPK/ERK 和 Akt 信 号 通路上 调肝癌细胞中周期蛋白D1 的表达，从而促进细胞增殖。

外泌体也与肝癌细胞的抗药性有关。高侵袭性肝癌来源的外泌体处理更容易抑制索拉非尼的抗肿瘤作用[15]。另外，肝癌外泌体可以将PTEN 的内源性抑制剂miR-32-5p 从耐药细胞递送至敏感细胞，从而诱导后者的多药耐药性[16]。外泌体中的 lncRNA ROR[17]和 lncRNA VLDLR[18]也有相似的作用。

2 外泌体调节肝癌组织微血管生成

Yukawa 等在HCC 患者血清外泌体和肝癌细胞系 HepG2 分泌的外泌体（HepG2-exo）中，发现了几种与血管生成相关的miRNA，进一步研究发现，用HepG2-exo 处理可以改变人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的 miRNA 图谱，促进其管腔形成[19]。另有研究发现，外泌体能将miR-210-3p 从肝癌细胞递送至内皮细胞，直接靶向Smad4 和STAT6，增强血管生成能力[20]。且肝癌外泌体中的miR-103可以靶向调节血管内皮细胞中的VE-Cad、p120和ZO-1 等黏附相关因子，破坏内皮细胞黏附连接的完整性，促进HCC 的侵袭和远端转移[21]。这也表明微血管不但能为肿瘤细胞提供营养，还为肿瘤的转移提供了便利途径。而这些都与外泌体息息相关。